5 de septiembre de 2018 16:13 PM
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Enfermedad de Marek, enfoque diagn贸stico progresivo

La Enfermedad de Marek (MD -del ingl茅s Marek鈥檚 Disease) es una grave amenaza para la industria av铆cola y su control depende mayoritariamente de una vacunaci贸n eficaz. Cuando se produce un brote de MD, la mayor铆a de las compa帽铆as llevan a cabo una auditor铆a de los protocolos de vacunaci贸n en incubadora. Adicionalmente, otros aspectos cr铆ticos deben […]

La Enfermedad de Marek (MD -del ingl茅s Marek鈥檚 Disease) es una grave amenaza para la industria av铆cola y su control depende mayoritariamente de una vacunaci贸n eficaz. Cuando se produce un brote de MD, la mayor铆a de las compa帽铆as llevan a cabo una auditor铆a de los protocolos de vacunaci贸n en incubadora. Adicionalmente, otros aspectos cr铆ticos deben ser monitorizados para poder comprender mejor el origen del brote. En este art铆culo se analiza un brote de MD de forma progresiva para resaltar los principales factores responsables de los fallos de vacunaci贸n/protecci贸n.

Los puntos cr铆ticos para establecer una inmunidad adecuada frente a MD incluyen:

  • Adecuado manejo de la vacuna durante el procedimiento de vacunaci贸n
  • Correcta administraci贸n de la vacuna
  • Replicaci贸n del virus vacunal en el pollo
  • Estimulaci贸n de una inmunidad adecuada capaz de proporcionar protecci贸n frente al virus de la Enfermedad de Marek (MDV)

Una adecuada monitorizaci贸n de la vacunaci贸n puede realizarse mediante la medici贸n de la replicaci贸n del virus vacunal en el pollito de una semana de vida. Monitorizar la vacunaci贸n no solo proporciona informaci贸n sobre la protecci贸n del lote frente a MD, sino que tambi茅n sirve para confirmar que la vacunaci贸n se ha hecho correctamente La protecci贸n frente a MD puede monitorizarse mediante la evaluaci贸n de la carga viral de MDVs oncog茅nicos en pollitos a partir de las 3 semanas de vida. En caso de que se sospeche de virus m谩s virulentos, se puede determinar el patotipo de las cepas aisladas para establecer el programa vacunal apropiado. Comprender todos los puntos cr铆ticos mencionados es la 煤nica forma de mejorar de forma efectiva los m茅todos de control de MD.

Conociendo el problema

La enfermedad de Marek (MD) es una enfermedad linfoproliferativa causada por el virus de la Enfermedad de Marek (MDV), un herpesvirus que afecta a los pollos. La enfermedad de Marek se ha logrado controlar con 茅xito desde finales de los a帽os 60. Sin embargo, espor谩dicamente se producen brotes de MD en lotes vacunados, provocando p茅rdidas econ贸micas significativas y una gran preocupaci贸n para la industria av铆cola. Una vez que se ha confirmado un brote de MD, es importante evaluar todos los puntos cr铆ticos que hayan conducido a un fallo en la inmunizaci贸n. En el presente art铆culo se repasan los pasos a seguir para investigar un brote de MD (Figura 1).

patolog铆a aviar

Cuando se produce un brote de MD, las compa帽铆as deben realizar una auditor铆a de la vacunaci贸n para comprobar que las vacunas se manipulan correctamente y que ninguno de los pasos mencionados anteriormente se ha visto afectados.

Monitorizaci贸n de la vacunaci贸n

Verificaci贸n de la vacunaci贸n

Las vacunas MD est谩n asociadas a c茅lulas y requieren de cuidados especiales durante el almacenamiento, la reconstituci贸n y la administraci贸n.

patolog铆a aviar

Las vacunas MD son suspensiones inestables de c茅lulas y una mezcla inadecuada resulta en una baja uniformidad de las dosis. Asimismo, la mezcla peri贸dica de la vacuna es necesaria para evitar la sedimentaci贸n de las c茅lulas. La vacuna reconstituida debe mantenerse refrigerada y debe ser utilizada r谩pidamente (30-60 minutos).

La adici贸n de antibi贸ticos, otros aditivos u otras vacunas a las vacunas MD pueden afectar significativamente al t铆tulo de anticuerpos frente a las mismas

Titulaci贸n de la vacuna (ensayo de placa)

La titulaci贸n de las vacunas MD se puede hacer mediante ensayo de placa. Es importante que la titulaci贸n se haga:

  • A partir del vial
  • A partir de la vacuna reconstituida
patolog铆a av铆cola

El contaje de c茅lulas vivas ha demostrado ser una alternativa para valorar el manejo que se realiza en la planta de incubaci贸n. Aunque el contaje de c茅lulas no proporciona informaci贸n sobre la cantidad de virus vacunal presente en la vacuna, al menos puede proporcionar pruebas directas de un manejo inadecuado si el n煤mero de c茅lulas muertas es muy elevado o si aumenta r谩pidamente tras su reconstituci贸n.

Monitorizaci贸n de la replicaci贸n de la vacuna en los pollos

La replicaci贸n de la vacuna se puede evaluar mediante la determinaci贸n del ADN viral en el fol铆culo de la pluma o el bazo. El uso de sangre no est谩 recomendado ya que se han notificado muchos falsos negativos. Monitorizaci贸n de la replicaci贸n de la vacuna en los pollos Los resultados obtenidos a partir de muestras de bazo y de pulpa de la pluma son muy compatibles, teniendo la pulpa de la pluma una ventaja log铆stica al poder obtenerse a partir del pollo vivo. Es esencial recoger muestras individuales de los pollos

patolog铆a av铆cola

1 semana de vida

El mejor momento para monitorizar la vacunaci贸n es cuando los pollos tienen 1 semana de vida, ya que es posible diferenciar los pollos que han recibido la dosis completa de los que han recibido la dosis diluida. A partir de las 3 semanas de vida, el virus vacunal puede ser detectado en la mayor铆a de los pollos, independientemente de la dosis vacunal administrada. El porcentaje de muestras en las que el virus vacunal puede ser detectado la primera semana de vida depende de:

  • Edad de vacunaci贸n
  • Dosis vacunal
  • Cepa vacunal empleada
  • Factores fundamentales a la hora de interpretar los resultados

Se han descrito cebadores espec铆ficos para cada serotipo y son empleados frecuentemente para diferenciar entre las vacunas de los serotipos 2 y 3, y los virus del serotipo 1. Cuando se emplea la cepa vacunal CVI988 del serotipo 1, es necesario usar cebadores espec铆ficos de CVI988 y que no amplifiquen otros serotipos 1 de MDV. Esta t茅cnica requiere de unas condiciones rigurosas, debiendo ser muy cuidadosos durante su realizaci贸n, as铆 como a la hora de interpretar sus resultados.

Monitorizaci贸n de la infecci贸n temprana con MDV oncog茅nico

Tras la administraci贸n de las vacunas MD, se tardan aproximadamente 5-7 d铆as para alcanzar el nivel m谩ximo de protecci贸n. La infecci贸n con MDVs oncog茅nicos a menudo ocurre antes de los 5-7 d铆as en las granjas, lo cual pone en riesgo la eficacia de la vacuna. Es posible determinar si se ha producido una infecci贸n temprana del lote mediante la cuantificaci贸n de la carga de ADN de MDV en el fol铆culo de la pluma, bazo o sangre de pollos de 1 semana de vida.

patolog铆a av铆cola

Monitorizaci贸n de la protecci贸n/diagn贸stico temprano

Recientemente, hemos demostrado que la evaluaci贸n de la carga de ADN de MDV en el fol铆culo de la pluma o en muestras de sangre a partir de las 3 semanas de edad puede ser 煤til para predecir la protecci贸n de un lote (9-11).

Si se recogen muestras de sangre, es importante que el anticoagulante empleado sea EDTA, siendo esencial evitar que se mezclen muestras de diferentes aves. Las muestras pueden ser almacenadas a -70鈦癈 o recogidas en tarjetas FTA庐 y mantenidas a temperatura ambiente

  • Lotes protegidos adecuadamente

En los lotes protegidos adecuadamente frente a MD, la mayor铆a de los pollos tienen una carga baja de ADN de MDV, compatible con niveles de latencia.

  • Lotes no protegidos adecuadamente

Sin embargo, en los lotes que no est谩n protegidos correctamente, muchos pollos tienen una elevada carga de ADN viral en unos niveles comparables a los tumores inducidos por MDV.

Patotipificaci贸n de MDV

A pesar de que se han hecho varios intentos para encontrar marcadores moleculares de virulencia, hasta el momento la 煤nica forma de determinar el patotipo de los MDV aislados es a trav茅s de pruebas biol贸gicas

Un diagn贸stico certero de la MD es muy importante para descartar otras enfermedades tumorales inducidas por virus o s铆ndromes no-neopl谩sicos causantes de lesiones nerviosas. Sin embargo, una vez que se ha confirmado la MD, es necesario investigar el brote e identificar los factores que contribuyeron a 茅l. En muchos casos hay m谩s de un factor, pero la 煤nica forma de encontrar una soluci贸n adecuada es mediante la comprensi贸n de las causas desencadenantes del brote

Prueba Gold Standard

La prueba 鈥淕old Standard鈥 o de referencia se basa en medir la capacidad del MDV de alterar la inmunidad proporcionada por varias vacunas MD, estando los MDV virulentos (vMDV) protegidos por HVT; los MDV muy virulentos (vvMDV) protegidos por HVT+SB-1; y los MDV muy virulentos plus (vv+MDV) protegidos por CVI988.

patolog铆a av铆cola

Estudio An谩lisis

Cuando se sospecha de un incremento de la virulencia se recomienda investigar si el protocolo vacunal empleado puede proteger efectivamente frente a esos aislados en concreto.

Otras alternativas

Se han descrito pruebas alternativas a la prueba patotipificaci贸n 鈥淕old Standard鈥, como la atrofia de los 贸rganos linfoides, neuropatotipificaci贸n y carga de ADN viral. Todas las pruebas alternativas pueden diferenciar f谩cilmente entre v y vv+, pero son incapaces de discernir entre MDV vv y vv+. Ser谩 necesario llevar a cabo m谩s estudios para simplificar la patotipificaci贸n de MDV y para hacer que tenga una mayor disponibilidad para otros laboratorios.

Fuente: avicultura.info

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